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輔仁大學 生命科學系碩士班 李嘉雯所指導 陳建云的 JA誘導水稻PR基因啟動子之功能性分析 (2021),提出Fragment Levis關鍵因素是什麼,來自於植物逆境、水稻、啟動子、逆境激素、甲基茉莉酸、分泌性訊息胜肽。
而第二篇論文國立高雄科技大學 水產食品科學系 謝淑玲所指導 黃昭程的 乙型受體素檢測發展與其技術未來展望 (2021),提出因為有 乙型受體素、萊克多巴胺、瘦肉精、快篩、色譜層析法、免疫標記分析、感測器分析的重點而找出了 Fragment Levis的解答。
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JA誘導水稻PR基因啟動子之功能性分析
為了解決Fragment Levis 的問題,作者陳建云 這樣論述:
植物為了克服多種環境逆境,會引發各種的訊息調控,以增加抗性或適應性。先前的研究於水稻懸浮培養液中鑑定出分子量為34 kDa之蛋白質 (PR-8),且屬第三型幾丁質酶,並以各種逆境反應相關激素處理後發現,PR-8基因能受到甲基茉莉酸(MeJA)的誘導而表現。本研究進一步驗證PR-8基因在水稻幼苗全株皆會受MeJA之調控而有增加表現量。為了確認PR-8啟動子與JA訊息傳遞之調控活性區段,先以基因資料庫分析PR-8啟動子序列,發現有數個MYB、MYC、ERF和WRRY等逆境調控相關轉錄因子之結合域,依其分布初步將PR-8啟動子序列以5’端序列遞減方式設計四片段PR-8p.D0、D1、D2及D3構築
於啟動子表現載體,以用於菸草暫時性表現系統中分析啟動子活性,GUS活性分析後,經MeJA處理後PR-8p.D2和PR-8p.D3之啟動子活性均顯著提升,為進一步確認PR-8啟動子受JA訊息影響之關鍵活化位,接續設計以3’端序列遞減方式將啟動子序列3’端TATA box和5’UTR去除後加上35S minimal promoter,分別建構PR-8p.D1W、3’D1、D2W及D3W啟動子表現載體,GUS活性分析顯示,此四組3’端序列遞減的合成啟動子之基礎活性皆比PR-8全長啟動子者提高2~3倍,然而經MeJA處理後,活性則無明顯變化。此外,為回歸探討此水稻基因啟動子在水稻系統的基因調控特性,以
比較其與菸草模式中是否相同,本研究亦使用水稻懸浮細胞作為啟動子暫時性表現分析平台,5’端序列遞減之啟動子活性分析結果顯示,PR-8p.D0和PR-8p.D1受MeJA誘導,與其在菸草模式中的表現趨勢不同;而3’端序列遞減之啟動子分析結果顯示,PR-8p.D1W、D2W及D3W經MeJA處理後,均有GUS藍色產物,以上結果推測其啟動子D2至TATA box前的386 bp片段內含有JA訊息調控域。由於PR-8是一外泌性蛋白質,為了進一步探討其分泌訊息胜肽(Osss)在水稻細胞分泌性蛋白質表現系統之應用性,於菸草模式中觀察PR-8啟動子驅動表現Osss::GFP-GUS融合蛋白質,結果顯示GUS染
色藍色產物大量呈現在維管束,故推測GFP-GUS融合蛋白外泌至質外體後,累積於維管束周邊。綜合上述結果,PR-8啟動子D2-TATA間有1個MYB、2個ERF、2個MYC及2個WRKY反應之cis-elements,這些轉錄因子結合域可能與JA訊息傳遞有相關,且其基因中的5’UTR可能也影響啟動子的活性。未來可利用Osss分泌性及其啟動子誘導的特性,建立一具有應用性的水稻懸浮細胞分泌性外源蛋白質的表現系統。
乙型受體素檢測發展與其技術未來展望
為了解決Fragment Levis 的問題,作者黃昭程 這樣論述:
乙型受體素 (β-agonists) 為常見的動物用藥之一,可提升動物的瘦肉量,但經研究顯示攝取過量乙型受體素有可能造成身體不適。臺灣在開放含萊克多巴胺 (Ractopamine) 肉品進口後,政府部門及食品業者為確保食品安全,大幅提升檢驗量能,但目前的公告檢驗方法有其成本及門檻的侷限,使得開發可滿足不同需求的乙型受體素檢測技術有其必要性。本論文蒐集乙型受體素檢測技術相關文獻後,依其原理歸納出「色譜層析法 (Chromatography)」、「免疫標記分析 (Immunoassay)」、「感測器分析 (Sensor)」三大類型,再分別闡述各類型中的檢測技術其原理以及未來研究方向,最後針對各類
型技術進行SWOT分析,並考量其特性評估適合之檢驗情境。最終歸納研究結果針對色譜層析法、免疫標記分析、感測器分析分別提出建議為:需要具有公信力之定量檢驗方法推薦色譜層析法、有成本考量且對精確性要求不高的採用免疫標記分析、需考量成本效益但仍有定量需求則可考慮感測器分析;各自的未來研究方向分別為:色譜層析法注重在降低成本與時間上、免疫標記分析主要為開發新標記材料以提高其性能、感測器分析著重於提高檢測性能與開發微型化設備。由上述結果得知色譜層析法適合用於高精度檢測、免疫標記適合作為快篩試劑、感測器分析則適合發展可攜式設備之結論,以利後續學者在進行乙型受體素檢測技術相關研究時,能有所參考並節省摸索研究
方向時的精力與時間,並期望藉此降低開發乙型受體素各式檢驗技術之門檻,以達到滿足各種不同檢測需求甚至是實現分級檢測的目標。
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