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不同生醫材料對牙胚細胞增生、礦化及分化的影響

為了解決植牙費用的問題，作者陳蓉書 這樣論述：

牙齒是很獨特的器官，而身體結構內最為堅硬的組織就是牙齒，牙齒具有撕裂、研磨及壓碎食物、輔助發音以及協調臉形等重要功能。牙齒因齲齒、牙周病、外力撞擊以及腫瘤等因素所造成的牙冠缺損會造成生活不便影響生活品質並引發其他疾病。一旦牙齒有缺失，目前在臨床上的治療方式是採用牙冠、牙橋活動義齒或植入生物相容性之金屬材料做為支架然後放置人工牙冠或牙橋即所謂植牙的方式來取代缺損的牙齒。雖然，植牙可以滿足病患的需求，然而植牙費用較為昂貴、且需要進行手術，因此，較不易廣泛使用此方法來修補損失的牙齒。基於牙齒損失會造成生活不便及目前臨床上處理方法的限制加上牙齒是一個器官，探討牙齒再生即有助於調解器官再生，因此引發此

研究進入探討牙齒再生工程的動力。生醫材料在組織或器官再生工程中扮演重要的角色，適當的生醫材料可節有某些訊息傳遞路徑而影響細胞的生長與分化，因此，本研究將探討牙齒再生工程中，生醫材料對於牙胚細胞生長分化的影響。牙胚細胞，是形成牙齒的主要細胞來源，常用於牙齒再生的應用，包含有牙釉質母細胞、牙本質母細胞、間葉細胞及幹細胞。此研究以牙齒再生工程為主軸，探討牙胚細胞與生醫材料的關係，包括四部分：探討不同年齡之Wistar老鼠牙胚細胞之生長潛力；尋找合適與牙胚細胞生長的生醫材料，觀察牙胚細胞之行為表現；探討生醫材料如何提供類似與體內環境的生長條件以促使牙胚細胞增生、礦化及分化；藉由訊息傳遞路徑得知生醫材料

與牙胚細胞間之關係。牙齒隨成長年齡不同而有不同分子、結構等性質。因此，在進行牙齒再生的前提下，尋找適當的牙胚細胞來源是相當重要的。第一部份的研究目的即是藉由不同年齡大小的老鼠取得牙胚細胞，以作為之後應用於牙齒再生的細胞來源。有趣的是，此研究發現介於分化中期之牙胚細胞有良好的增生及分化能力。因此本研究之牙胚細胞將取於4天大的老鼠。生醫材料已被廣泛的應用於組織工程，然而，牙胚細胞與生醫材料間之關係卻是不明的。在第二部分中，為觀察生醫材料對於牙胚細胞的影響，針對不同親疏水性的醫用高分子進行比較，如較為親水的聚乙烯醇、親疏水性相似於細胞培養皿的共聚乙烯乙烯醇、聚乳酸甘醇酸及較為疏水的聚偏二氟乙烯。結果

顯示親疏水性相似於細胞培養皿的生醫材料可以促進牙胚細胞的貼附與生長，然而，較為疏水的生醫材料卻無法提供牙胚細胞良好的貼附與生長。令人驚訝的是，較為親水的聚乙烯醇導致牙胚細胞表現低生長行為且呈現懸浮聚集成球，而這些懸浮成球的牙胚細胞再重新培養回細胞培養皿是可以再次貼附於培養皿的。因次，第二部分的研究顯示出生醫材料是可以用來調控牙胚細胞生長行為。牙胚細胞培養於聚乙烯醇材料上顯現出較低的增生行為，過去文獻指出當細胞增生行為較為緩慢時，將有利於細胞誘導分化。由於細胞增生行為較為緩慢時，係指細胞與細胞間之接觸較為緊密，因此，延續第二部分的研究，在第三部分中，我們將牙胚細胞培養於聚乙烯醇材料上，藉由不同的

細胞密度以得到細胞與細胞間之接觸緊密程度不同，觀察聚乙烯醇材料對於牙胚細胞誘導分化的影響。結果顯示，相較於組織培養皿，不論培養之細胞密度高低，聚乙烯醇材料可有效促進牙胚細胞之鹼性磷酸酶(ALP)活性並提高礦化與分化的表現，特別是此材料亦可促使牙胚細胞表現特定之基因，即便在沒有誘導培養基的條件下。再者，此研究也顯示牙胚細胞的礦化與分化並非單靠懸浮聚集即可，且經由添加短片段之RGD胜肽，顯示聚乙烯醇材料可促使牙胚細胞分泌特定之細胞外基質，進而達到誘導牙胚細胞礦化與分化。再者，已有許多文獻指出有絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)對於骨系列母細胞誘導分化佔相當重要之角色，特別是經由細胞外訊息調控激酶(ER

K)路徑，然而，對於此路徑在骨細胞誘導分化中所扮演的角色之說法卻是迥然不同的。過去文獻指出活化細胞外訊息調控激酶路徑可促使細胞趨向分化途徑，然而亦有文獻指出抑制細胞外訊息調控激酶路徑可促使細胞分化。因此，在第四部分中，主要探討聚乙烯醇材料促使牙胚細胞礦化與分化的過程中，是藉由活化或抑制細胞外訊息調控激酶路徑。延續第三部分的研究，在第四部分研究中發現，即便在沒有誘導培養基的條件下聚乙烯醇材料仍可促使牙胚細胞礦化與分化。此外，經由添加細胞外訊息調控激酶抑制劑後，顯示出抑制細胞外訊息調控激酶路徑可促進牙胚細胞的分化。令人驚訝的是，在沒有誘導培養基的條件下，聚乙烯醇材料會促使牙胚細胞抑制細胞外訊息調控

激酶路徑。因此，可視聚乙烯醇材料對牙胚細胞之礦化與分化乃經由細胞外訊息調控激酶路徑，且扮演負調控因子之角色。綜合上述之結果，本研究的分析顯示出不同的生醫材料對於牙胚細胞增生，礦化及分化的影響，對於日後將生醫材料應用於牙齒再生將有相當大的幫助。