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國立臺灣大學 生化科學研究所 梁博煌所指導 陳俊旭的 建構與特性分析具有提高功效與熱穩定性之多功能纖維素/半纖維素分解酶 （2016），提出CELH stock關鍵因素是什麼，來自於生質能源、纖維素酶、半纖維素酶、融合酵素、統合生物加工過程。
而第二篇論文國立臺灣大學 生化科學研究所 梁博煌所指導 楊紫君的 設計建構多功能融合酵素分解纖維素/半纖維素以利於生產生質能源 （2012），提出因為有 纖維素酶、木聚醣酶、葡萄糖苷、酶、融合酵素的重點而找出了 CELH stock的解答。
建構與特性分析具有提高功效與熱穩定性之多功能纖維素/半纖維素分解酶
為了解決CELH stock 的問題，作者陳俊旭 這樣論述：
木質纖維素可被酵素水解並轉換成生質燃料。在實驗室先前的研究中，有一個從熱纖梭菌純化出來的雙功能水解酶(CtCel5E)，其具有的活性可分解兩種最主要組成植物細胞壁的多醣，分別為纖維素(為葡萄糖的多聚醣)和聚木醣(為木糖聚合而成的半纖維素主要構造)，使之最終分解為纖維二醣與木二醣。在之前碩士論文中，上述的雙功能酵素將與來自細菌或真菌的葡萄醣苷酶(CcBglA or TrBgl2 P172L)接合形成具cellulase, xylanase, 及β-glucosidase三種活性之融合酵素。在另一篇碩士論文中，CtCel5E中的一個flexible loop被另一來自T. maritima可分解
纖維素及甘露醣的雙功能酵素TmCel5A置換而稱為CtCel5E_Tmloop，因此增加了甘露聚糖酶 (mannanase)活性。而在本篇論文發現，CtCel5E-CcBglA此融合酵素還增加了熱穩定性。CtCel5E還與另一個具木糖苷酶與葡萄糖苷酶活性的雙功能酵素接合，比起兩個雙功能酵素的混合反應，此融合酵素一樣擁有更好的活性與熱穩定性。此論文證明了一種有效與便捷的方法來合併不同酵素活性以利於生質原料的處理。為了更進一步達成統合生物加工過程(consolidated bioprocessing)，融合酵素被篩選並轉殖於嗜甲醇酵母菌內。我們的最終目標是利用生物工程來創造一個能同時使用葡萄糖與木
糖的釀酒酵母發酵系統，來生產生質酒精。另外，為了增進三功能酵素(CtCel5E_Tmloop)的甘露聚糖酶活性，我們利用電腦軟體疊合一些甘露聚糖酶與CtCel5E_Tmloop的結構，並藉此結構分析來預測酵素工程的突變位置，接著使用點突變與DNA片段插入刪除實驗來驗證。
設計建構多功能融合酵素分解纖維素/半纖維素以利於生產生質能源
為了解決CELH stock 的問題，作者楊紫君 這樣論述：
組成植物細胞壁的木質纖維素為生質能源的重要原料；纖維素和半纖維素中的木聚醣(xylan)是木質纖維素最主要的組成物。纖維素可藉由纖維素酶將之分解成葡萄糖單體；而木聚醣酶則可將木聚醣分解成木糖單體，進而發酵成酒精。為了有效分解組成複雜的木質纖維素，一般需要製備多種醣苷水解酶以共同協同作用。如能將所需的各種酵素活性合併於一多功能融合酵素，此方式將能簡化酵素製備程序，降低生產成本。在本篇論文中，透過基因融合方式將熱纖梭菌之纖維素酶/木聚醣酶雙功能酵素(CtCel5E)與來自細菌或真菌之葡萄糖苷酶(CcBglA或TrBgl2)接合成為具三種活性之融合酵素。藉由酵素活性試驗與薄膜層析法實驗顯示此二融合
酵素確實保留了三種活性；並且，與雙功能酵素及葡萄糖苷酶(β-glucosidase)之酵素混和物相較，三功能融合酵素所展現的協同作用勝於酵素混和物，能更有效地分解人工纖維素成葡萄糖單體，而不會殘留雙醣。此外，CtCel5E-TrBgl2 P172L融合酵素能抑制原本TrBgl2之醣基轉移酶活性，避免已分解的葡萄糖合成回為寡醣。接著，進一步利用三功能融合酵素分解鹼處理之天然稻稈，結果顯示整個反應過程中，纖維二醣能有效地被水解為葡萄糖，酵素催化後之產物為葡萄糖與小分子木聚醣(雙醣、三醣為主)。若於三功能融合酵素催化之反應中外加木糖苷酶(β-xylosidase)，最終水解產物即為可發酵的葡萄糖與木
糖。總結來說，多功能融合酵素所提供的水解效率以及製備的方便性，將有助於降低生質能源成本。另外，為了瞭解此天然雙功能酵素(CtCel5E)如何能於同一活性位置辨認及催化纖維素與木聚醣，多種小分子受質利用電腦模擬出其與酵素之結合情形。根據電腦模擬與單定點突變實驗，顯示CtCel5E第202號組胺酸(His202)能與位於-1 subsite之葡萄糖分子形成氫鍵，但是與木糖則無法；所以，突變202號位置對於纖維素酶活性的影響甚於對木聚醣酶活性的影響。假使能進一步得到該酵素與不同受質共結晶之結構，相信能提供更完整關於受質選擇性的資訊，找到哪些關鍵胺基酸後，將有助於酵素的改造工程。