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製備包覆靛氰綠及阿黴素之聚乳酸甘醇酸-聚乙二醇交聯標靶奈米粒子用於乳癌光/化學治療之研究

為了解決on乳清蛋白ptt的問題，作者張達盛 這樣論述：

本研究以微乳液法製作包覆抗癌藥物阿黴素(Doxorubicin)與光敏試劑靛氰綠(Indocyanine Green；ICG)之聚乳酸甘醇酸(Poly(Lactic-co- Glycolic Acid)；PLGA)-聚乙二醇(Polyethylene glycol；PEG)並於表面接枝人類上皮生長因子2(human epidermal growth factor receptor 2；HER2)單株抗體之新穎生物可降解性標靶奈米藥物載體(HER2-target ICG-DOX-Loaded PLGA-PEG Co-polymeric Nanoparticles;；HIDPNPs)，並測試該載

體對於乳癌細胞進行複合式癌症治療之可行性。本研究首先以傅立葉轉換紅外線光譜儀與核磁共振儀確認PLGA及PEG共聚高分子合成效果，完成載體製備後再以螢光表現抗體及BCA蛋白質檢測證明HER2抗體於產品表面之存在與生物活性。經過動態光散射儀器分析HIDPNPs之平均粒徑與表面電位分別為266  4.3 nm和-12  4.48 mV；對於DOX及ICG的包覆率分別約為35%及79%；包藥率則分別約為0.15%及0.34%。再由UV-Vis分光光度計分析降解率得到48小時內HIDPNPs在4℃及37℃環境下所包覆的ICG降解率比單純溶解於水中之ICG分別低11%及54%；48小時內HIDPNPs

在4℃及37℃環境的DOX釋放率分別為13%及26%。以激發波長808 nm搭配強度為 6 W/cm2的近紅外光雷射照射HIDPNPs奈米載體，結果發現ICG包覆濃度大於1μM下照射90秒內溶液溫度上升超過40℃並且可維持高溫長達5分鐘，另外藉由SOSG檢測單態氧濃度發現於5分鐘內的單態氧生成量和HIDPNPs的濃度成正比關係，在包含相等於4μM ICG的HIDPNPs其單態氧生成量比在相同濃度下單純ICG水溶液高出約3倍。藉由偵測被細胞攝取後的HIDPNPs其所發射的ICG螢光強度發現MDA-MB-453(HER2+)的螢光值明顯大於MCF-7 (HER2-)，如此證明了HIDPNPs

對HER2表現的細胞具有主動靶向的功能。將HIDPNPs和MDA-MB-453乳癌細胞而共同培養12小時再以近紅外光雷射照射5分鐘後，經由計算得知包覆4μM ICG及3μM DOX的HIDPNPs之毒殺細胞效率比單純使用ICG或DOX分別高了1.5 (P < 0.05)及2.6 (P < 0.05)倍，此一結果證明HIDPNP可以有效的減少化療劑量並且搭配光療法以增加或維持乳癌治療效果，因此有望發展成為一種治療癌症的材料。

功能性奈米材料應用於偵測纖溶相關蛋白與循環腫瘤細胞及腫瘤細胞的光治療

為了解決on乳清蛋白ptt的問題，作者邱緯真 這樣論述：

本研究中我們主要為開發功能性奈米材料應用於偵測纖溶相關蛋白(Fibrinolytic-Related Proteins)、循環腫瘤細胞(Circulating Tumor Cells; CTCs)及光治療(Phototherapy)腫瘤細胞(Tumor Cells)。於偵測纖溶相關蛋白及循環腫瘤細胞部分，結合雷射脫附游離質譜(Laser desorption/ionization Mass Spectrometry; LDI-MS)作為一分析工具進行檢測。纖溶系統為一藉由纖溶酶(plasmin)將纖維蛋白降解而回復正常血管功能的機制，於第一個研究工作中，在仿生理條件下將修飾纖維蛋白原的金奈米

粒子(FibrinogenGold Nanoparticles; FibAu NPs)探針和纖溶酶反應後，降解金奈米粒子表面之纖維蛋白原，導致金奈米粒子聚集，再將其吸附上混合纖維素脂膜(Mixed Cellulose Ester Membrane; MCEM)。因纖溶酶降解FibAu NPs後使其與MCEM吸付能力降低，故在脈衝雷射(355 nm, 6 ns)照射MCEM下，碎裂Au NPs所形成金團簇訊號強度會下降，藉由金團簇訊號改變可定量溶液中纖溶酶。MCEM在LDI-MS中可降低背景雜訊干擾，提高偵測靈敏性亦提供良好的再現性(相對標準偏差小於5%)。利用此方法可成功的在人類血清環境

中高度靈敏地偵測纖溶酶(偵測極限: ca. 0.1 nM) 並具有高度選擇性。此簡單、快速、靈敏、高通量的檢測法，於臨床醫學檢驗蛋白活性上相當具有發展性。於第二個研究中我們探討金奈米薄膜(Gold Nanofilms; Au NFs)於不同厚度(10100 nm)在脈衝雷射(355 nm, 6 ns)照射下形成Au NPs大小、密度以及金團簇訊號強度的變化，研究發現Au NFs厚度、脈衝雷射能量與金奈米粒子的形成有相當的關係，較薄Au NFs與高雷射能量易形成高密度小粒子的Au NPs。隨後，我們藉由金硫鍵結(Au-S bond)於Au NFs(厚度20 nm)表面修飾具與特定腫瘤細胞專一性

結合MUC1的功能性核苷酸適合體(MUC1 Aptamer; AptMUC1)，合成出具專一性之AptMUC1−Au NFs偵測平台，結合雷射脫附游離質譜可透過監測金團簇訊號強度變化靈敏地在人類全血環境中高選擇性的檢測乳癌腫瘤細胞(MCF-7)，其偵測極限可達至10顆癌細胞。我們所開發出偵測循環腫瘤細胞的方法具有簡單、快速和易操作等優點，將來可應用於腫瘤轉移的研究。於第三部分研究中，我們致力於發展奈米材料應用於結合腫瘤細胞的光熱治療(Photothermal Therapy; PTT)及光動力治療(Photodynamic Therapy; PDT)的雙重療效(PTT/PDT)試劑並成功的在荷

瘤老鼠實驗上獲得良好的治療效果。我們利用二價鐵離子在三羥甲基氨基甲烷硼酸鹽溶液反應下會與還原型氧化石墨烯(reduced Graphene Oxide; rGO)自組裝形成氫氧化鐵/氧化鐵石墨烯複合(FeOxH‐rGO)的方式簡易製備雙重光治療之複合型奈米材料。奈米石墨烯及其氧化衍生物具有較大的比表面積和優異的光熱效果等性質，已成為奈米醫學領域中備受關注的研究重點。由於氧化石墨烯特殊表面結構及官能基使其在紅外光區域有很強的吸收及光熱轉換效率，大幅增加了腫瘤細胞光熱治療的應用性。而我們所製備的FeOxH‐rGO表面沉積之不規則氫氧化鐵/氧化鐵在光照射下則會進行類似Fenton反應於水溶液中產生氧

化自由基(Reactive Oxygen Speices; ROS)促進腫瘤細胞凋亡達到光動力治療之效果。我們使用808 nm雷射作為FeOxH–rGO進行腫瘤細胞光治療的光源，在體外(in vitro)及體內(in vivo)動物實驗部分均有相當顯著的治療效果。此一結合光熱及光動力治療(PTT/PDT)效果之奈米複合型材料，不僅製備簡易、成本較低，其以近紅外光源做為啟動治療開關達到雙重治療效果，大幅降低了在臨床腫瘤細胞治療上風險及後遺症，在臨床治療上相當具有發展潛力。